膠原蛋白(CO)和硫酸軟骨素(CS)是大多數組織的天然細胞外基質(ECM)的必需成分。它們提供機械穩定性以消除ECM中的壓縮力。在組織工程中,電紡絲技術制備的納米纖維支架已成為模仿天然ECM功能的合適候選材料。除了在生理條件下增加的降解穩定性之外,與EDC / NHS的交聯可以克服工程支架的弱機械完整性。與EDC/NHS的交聯可以克服組織工程支架在生理條件下較弱的機械完整性,增加降解穩定性。
在化學交聯劑中,與戊二醛相比,1-乙基-3-(3-二甲基-氨基丙基)-1-碳二亞胺鹽酸鹽(EDC)是一種低細胞毒性的化合物。EDC廣泛應用于交聯重組的膠原原纖維,有助于防止副產物的形成,而且它還增加了反應速度。本研究采用靜電紡絲法合成納米纖維膠原-CS支架材料。以六氟異丙醇(HFIP)與水的混合物為溶劑,溶解混合的CO和CS,得到了適合于電紡絲實驗的均相溶液。將制備的納米纖維支架與兩種濃度的EDC/NHS交聯劑交聯,采用人角膜上皮細胞(HCE)進行支架體外細胞相容性檢測。
結果表明,加入較高濃度的CS以及EDC / NHS交聯劑可提高支架的機械穩定性。同時,支架顯示出對膠原酶消化的更強抵抗力,在角膜上皮細胞附著中顯示出生物相容性。交聯的電紡CO-CS墊具有均勻的納米纖維和多孔結構,特別是對于交聯劑濃度較低的纖維墊,可作為組織工程中有效的替代基質。

圖1不同濃度的交聯納米纖維墊的SEM圖像(1,000×)。

圖2不同時間膠原酶溶液中交聯和非交聯墊的降解百分比。
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